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一、前言

胶原蛋白作为人体内含量最多且最重要的蛋白，功能性凸显，应用领域广泛。近两年来，重组人源化胶原蛋白逐渐在胶原蛋白护肤市场显露锋芒。

二、什么是重组胶原蛋白

重组胶原蛋白是通过将胶原蛋白的天然基因序列或重新优化设计的基因序列，导入选定的宿主细胞中，如：大肠杆菌和酵母菌，经过培养、发酵、分离纯化等工艺，获得的具有一定天然胶原蛋白特征和主要功能的蛋白质。

简单说，就是基因重组（克隆）

叁、胶原蛋白的种类

胶原蛋白是人体内丰富的蛋白质之一，在人体的眼周、嘴周、腋窝、手臂、腹部等各个部位都需要胶原蛋白，它通过在细胞结构上形成支撑网，负责维持身体组织的稳定性和强度。迄今为止，在人体中已经发现了 29 种胶原蛋白。按照发现的顺序依次命名为 I、II、III、IV 型胶原蛋白等，其中I型胶原含量最多，约占胶原总量的80-90%，其余10-15%为III型胶原。

四、胶原蛋白的制备工艺

胶原蛋白的提取方法主要分为两类：动物源提取法和基因重组法

1. 动物源提取法

   动物源提取法是通过酸法、碱法或者酶法从动物皮肤、跟腱部位提取胶原蛋白。酸法将前处理（去脂、切片、粉碎）后的样品酸解，获得酸溶性胶原蛋白，优点是蛋白叁螺旋结构完整、成纤维性能好，成本较低但存在较高的免疫原性风险。酶法常使用胃蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶地切割胶原蛋白的末端肽，主体溶于中性或酸性溶液中，最终被提取，该方法获得的胶原纯度高、理化性质较好，常用于高附加值产物的开发。

   通过纳米佐剂的设计和修饰，可以实现对特定靶点的递送，如免疫细胞或靶向组织。这种靶向递送可以增加疫苗在特定区域的作用效果，并减少疫苗的剂量和副作用。

2. 基因重组法

   基因重组法是将人胶原蛋白基因序列进行特定设计、酶切和拼接、连接载体后转入工程细胞，通过发酵表达生产胶原蛋白。主要包括表达体系的构建、发酵以及纯化3个过程。表达体系存在原核、真核、昆虫病毒、哺乳动物等多个表达体系，但目前可进入工业化生产或已商品化的重组胶原蛋白主要采用基于大肠杆菌、酵母等微生物发酵的技术。

   相比动物源提取法，重组法可加工性（如水溶性和乳化特性）较好，能降低免疫原性。

   五、重组胶原蛋白的纯化

   重组胶原蛋白目前运用最多的是大肠杆菌，毕赤酵母表达体系。对于最终产物来说，它们都需要对表达后的收获组分经分离纯化，提取纯净的胶原蛋白。

   作为分离纯化的第一步，细胞破碎是至关重要的一环。细胞破碎的过程能够有效释放细胞内的目标物质，以确保后续纯化步骤的顺利进行和最终产物的质量。高压均质是常用的机械裂解方法，具有良好的可放大性，且不需要添加额外的试剂。

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